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发布时间: 2025-03-25 07:23:58 作者:admin

本文目录一览:

  • 1、covestro官网
  • 2、jmtt是什么
  • 3、请问做mtt法时,怎么对药物进行梯度稀释?

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请问做mtt法时,怎么对药物进行梯度稀释?

一般是两倍梯度稀释,第一孔加200ul含有药物的培养液,第二孔加100ul培养液,第三孔加100ul培养液。。从第一孔取100ul加到第二孔混匀,从第二孔取100ul加到第三孔混匀,第三孔取100ul扔掉。。

通常在前一天下午铺板,次日上午加药物,建议使用5-7个药物浓度梯度,每孔100ul,并设置3-5个复孔以确保结果的准确性。孵育16-48小时后,使用倒置显微镜观察细胞状态。加入20ul的MTT溶液(0.5%浓度)进行4小时的继续培养。若反应正常,可先离心弃去培养液,用PBS清洗后加入MTT溶液。

在进行贴壁细胞MTT实验时,需注意以下步骤:首先,收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度至每孔100ul,铺板密度为1000-10000孔/板(边缘孔用无菌PBS填充),然后在5%CO2,37℃条件下孵育至细胞单层铺满孔底。

分析:通过计算不同浓度药物的抑制率,确定IC50,即50%抑制率对应的药物浓度,通过梯度稀释药品,绘制抑制率与浓度的关系图。在进行MTT实验时,需要注意控制细胞活力在IC50以下,以减少非凋亡性杀伤的影响。

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